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粒径与浓度检测(NTA / NanoFCM)
Nanoparticle Tracking Analysis & NanoFCM
🔬 表征鉴定 板块|演示环境 · 内容持续校订中
一句话总结:量化外泌体的粒径分布与绝对浓度。NTA 追踪布朗运动,NanoFCM 单颗粒散射——两种平台各有优势。
原理
NTA(ZetaView/NS300)通过激光散射追踪单个颗粒的布朗运动,Stockes-Einstein 方程反推粒径;NanoFCM 以单颗粒侧向散射(SS)光信号配合硅球标曲直接输出粒径与绝对浓度,通量更高、所需样本更少。
材料与试剂
- ZetaView 或 NS300 或 NanoFCM N30E
- 聚苯乙烯/SiO₂ 粒径标准品
- 质控微球
- 预冷 1× PBS(0.22 μm 过滤除颗粒)
详细步骤(可照做)
共 5 步 · 参数以标准样本量为准,请按实际情况等比调整
- 1
开机预热,标准微球校准光路与焦距。
- 2
样本冰上缓融混匀,PBS 梯度稀释至最佳检测区间(NTA 视野内 20–100 颗粒/帧)。
- 3
注射泵恒流速进样,排尽气泡静置稳定。
- 4
连续采集布朗运动视频(多位点扫描提升代表性)。
- 5
软件设定阈值追踪颗粒轨迹,输出粒径分布曲线与 particles/mL 绝对浓度。
关键参数速查
| 有效粒径范围 | 30–200 nm 主峰 |
| 稀释要点 | 梯度稀释找到最佳区间,过高重叠过低信噪比差 |
| 报告要素 | 峰值粒径 / 分布跨度 / 绝对浓度 / 稀释倍数 |
| 平台选择 | NanoFCM 通量高样本省;NTA 更普及易对标文献 |
⚠️ 常见坑与避坑指南
- PBS 必须预先 0.22 μm 过滤,否则 buffer 本底颗粒干扰巨大
- 不同平台原理不同,数值不可跨平台直接比较——论文注明仪器型号
- 样本解冻后轻柔混匀即可,涡旋产生的气泡会被误计为颗粒
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本项目服务:粒径检测(NanoFCM 默认/ZetaView/NS300)含税参考价:200–400 元/样周期:3–5 个工作日
本词条为科研知识分享,方法描述基于公开文献与行业通行实践整理,具体实验参数需结合您的样本类型与仪器条件预实验验证。 展示内容可能存在滞后或疏漏,正式立项前请与生命互联技术团队确认。