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PEG 沉淀法
Polymer Precipitation
🧪 样本处理与分离 板块|演示环境 · 内容持续校订中
一句话总结：操作最简单的批量分离方法。PEG6000 改变囊泡水化层促其聚集，过夜沉淀即可收获。
原理
亲水性聚合物 PEG6000 夺取囊泡表面的水化膜，降低其溶解度，促使囊泡交联聚集为可离心回收的絮状沉淀。无需超速离心设备，适合大批量样本的快速处理，但共沉淀杂质较多。
材料与试剂
- PEG6000（生工 A610432）
- 预配沉淀工作液
- 冷冻离心机
- 预冷无颗粒 PBS
详细步骤（可照做）
共 6 步 · 参数以标准样本量为准，请按实际情况等比调整
- 1
样本常规预澄清（2,000×g 30 min + 10,000×g 45 min + 0.45 μm 过滤）。
- 2
量取上清体积，加入等体积（1:1 v/v）PEG6000 沉淀工作液。
- 3
缓慢颠倒混匀，4 ℃ 静置孵育过夜。
- 4
4 ℃、10,000×g 离心 60 min，管底可见乳白色絮状沉淀。
- 5
小心吸去绝大部分上清，离心管倒置于吸水纸上彻底沥干残液。
- 6
适量预冷 PBS 轻柔重悬沉淀即得外泌体。
关键参数速查
| PEG 浓度 | 工作液按说明书（通常终浓度 8–10%） |
| 孵育条件 | 4 ℃ 过夜（≥12 h） |
| 离心力 | 10,000×g × 60 min |
| 优点 | 无需超离设备 / 操作门槛最低 |
⚠️ 常见坑与避坑指南
- PEG 残留会干扰下游细胞实验和某些检测，需充分重悬洗涤
- 共沉淀杂蛋白与核酸较多——发表级数据慎用此法单独成文
- 适合初步探索与大批量粗提，精确定量前建议再纯化一步
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本项目服务：聚合物沉淀（PEG）含税参考价：200 元/50mL周期：3 个工作日
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