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纯度检测(Triton 裂解法)
Purity Assay by Membrane Lysis
🔬 表征鉴定 板块|演示环境 · 内容持续校订中
一句话总结:破膜前后颗粒数对比直接给出「真囊泡占比」——应对审稿人质疑纯度的有力数据。
原理
Triton X-100 特异性溶解脂质双分子层。破膜前后各测一次颗粒浓度:下降的部分就是真囊泡,不变的部分是非膜性杂质颗粒(蛋白聚集物、脂蛋白等)。两者之比即为纯度百分比。
材料与试剂
- NanoFCM 或 NTA
- Triton X-100(麦克林 T824275,配 10% 工作液)
- 冰盒
详细步骤(可照做)
共 5 步 · 参数以标准样本量为准,请按实际情况等比调整
- 1
样本 PBS 梯度稀释至检测区间,先测破膜前浓度。
- 2
取 45 μL 同批稀释液 + 5 μL 10% Triton X-100,轻柔混匀。
- 3
冰上孵育 1 h 使脂质双层完全溶解。
- 4
相同仪器参数下复测破膜后浓度。
- 5
纯度 % = (破膜前浓度 − 破膜后浓度) / 破膜前浓度 × 100%。
关键参数速查
| Triton 工作液 | 10%(v/v) |
| 孵育 | 冰上 1 h |
| 示例判读 | 9.95E+8 → 2.56E+8 即纯度 74.3% |
| 参考阈值 | >70% 通常认为合格,>85% 优秀 |
⚠️ 常见坑与避坑指南
- 两次检测参数必须完全一致,否则对比无效
- Triton 本身有本底信号,空白对照不可省略
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本项目服务:纯度检测(裂解法)含税参考价:500 元/样周期:3 个工作日
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