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纯度检测(Triton 裂解法)

Purity Assay by Membrane Lysis

🔬 表征鉴定 板块|演示环境 · 内容持续校订中

一句话总结:破膜前后颗粒数对比直接给出「真囊泡占比」——应对审稿人质疑纯度的有力数据。

原理

Triton X-100 特异性溶解脂质双分子层。破膜前后各测一次颗粒浓度:下降的部分就是真囊泡,不变的部分是非膜性杂质颗粒(蛋白聚集物、脂蛋白等)。两者之比即为纯度百分比。

材料与试剂

  • NanoFCM 或 NTA
  • Triton X-100(麦克林 T824275,配 10% 工作液)
  • 冰盒

详细步骤(可照做)

共 5 步 · 参数以标准样本量为准,请按实际情况等比调整

  1. 1

    样本 PBS 梯度稀释至检测区间,先测破膜前浓度。

  2. 2

    取 45 μL 同批稀释液 + 5 μL 10% Triton X-100,轻柔混匀。

  3. 3

    冰上孵育 1 h 使脂质双层完全溶解。

  4. 4

    相同仪器参数下复测破膜后浓度。

  5. 5

    纯度 % = (破膜前浓度 − 破膜后浓度) / 破膜前浓度 × 100%。

关键参数速查

Triton 工作液10%(v/v)
孵育冰上 1 h
示例判读9.95E+8 → 2.56E+8 即纯度 74.3%
参考阈值>70% 通常认为合格,>85% 优秀

⚠️ 常见坑与避坑指南

  • 两次检测参数必须完全一致,否则对比无效
  • Triton 本身有本底信号,空白对照不可省略

💰 不想自己做?交给生命互联

本项目服务:纯度检测(裂解法)含税参考价:500 元/样周期:3 个工作日

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